Ufa, acho que agora sim vou escrever meu primeiro post! E isso não poderia ter acontecido em melhor hora, pois consegui finalmente amplificar a minha sequencia com um primer um poucoooo estranho. Calma vou explicar. Trabalho com a produção de proteínas recombinantes e resolvi facilitar o meu trabalho no futuro colocando no primer uma cauda de histidina para purificação. Até aí sem problemas, certo? Errado!!! Pois eu também coloquei uma sequencia para restrição enzimática e outra para reconhecimento de uma protease. Isso me deixou com um primerrrrrrr gigante, e uma Tm de quase 75ºC (mais alta que a temperatura de extensão!!!). Para solucionar este problema fiz uma reação de PCR com gradiente e de 12 amostras consegui sucesso na amplificação em 9 temperaturas!!!
Acho que não podia começar melhor né!!! Se alguém quiser saber mais a respeito desta minha aventura é só me escrever (viegasacc@gmail.com)
sexta-feira, 13 de novembro de 2009
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Adorei o layout, muito bom gosto e muito sóbrio.
ResponderExcluirBjs.
Andy.